中圖分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2020)11-1303-06

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.11.04

    摘 要 目的：基于核因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路研究夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制。方法：采用谷氨酸(5 mmol/L)建立HT22细胞损伤模型后，以水溶性维生素E为阳性对照(50 ?mol/L)，采用MTT法检测0(空白对照)、25、50、100 ?g/mL夜关门的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞增殖的影响。以水溶性维生素E为阳性对照(50 ?mol/L)，采用2′，7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针(DCFH-DA)法检测0(空白对照)、25、50、100 ?g/mL夜关门二氯甲烷提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞中活性氧(ROS)水平的影响;以HO-1激动剂钴-原卟啉为阳性对照，采用Western blotting法检测0(空白对照)、25、50、100 ?g/mL夜关门二氯甲烷提取物处理24 h后对细胞中HO-1蛋白表达的影响;分别采用Western blotting法(药物分别处理0.5、1、1.5 h)和免疫荧光染色法(药物处理1 h)检测100 ?g/mL夜关门二氯甲烷提取物处理后对细胞核内外Nrf2蛋白表达的影响 ...... 婵犵數濮烽。浠嬪焵椤掆偓閸熷潡鍩€椤掆偓缂嶅﹪骞冨Ο璇茬窞闁归偊鍓涢悾娲⒑闂堟胆褰掑磿閺屻儳鍙曟い鎺嗗亾闂囧鏌ㄥ┑鍡欏缁绢厼鐖奸弻鈩冩媴闂堟稈鍋撳┑瀣祦鐎广儱娲犻崑鎾绘晲鎼粹€茬凹缂備降鍔嶅銊ф閹烘垟妲堟慨妤€妫欐晥缂傚倷妞掔欢銈嗕繆閸ヮ剙绠熼柟缁㈠枛闁卞洭鏌ｉ弬鍨棌婵″樊鍨跺娲传閸曨偅娈舵繝娈垮枤閺佺ǹ鈽夐悽绋块唶闁哄洨鍋犻幗鏇㈡⒑闂堟冻绱￠柛鏇ㄥ幘閺嗩垶姊绘担鐑樺殌闁宦板姂閹囧籍閸屾粎鐣堕梺鍛婁緱閸犳鎱ㄥ⿰鍫熺參婵☆垯璀﹀Σ鍝モ偓娈垮枛濞硷繝寮婚敓鐘茬＜婵﹩鍘鹃妶顐ょ磽娴ｄ粙鍝虹紒璇茬墕閻ｇ兘鏁愭径妯绘櫖濠电娀娼уΛ妤呯嵁鐎ｎ喗鈷戦柛婵嗗椤忔挳鏌涢妸褎鏆柨婵堝仱閺佸啴宕掑槌栧晣婵犵數濮撮敃銈夊箠鎼淬劌纾荤€广儱娲犻崑鎾斥枔閸喗鐏嶅┑鐐插级閿曘垽鐛弽顓炲窛濠电姴鍊荤粣鐐烘煛婢跺﹦澧愰柡鍛矒瀹曟椽宕掗悙瀵稿帗闂侀潧顧€婵″洭鎯屾惔銏㈢闁哄鍨堕ˉ銏ゆ煙椤栨氨校闁瑰嘲鎳庨湁閻庯綆浜欐竟鏇炩攽閻樿尙浠涢柟绋垮⒔缁牊寰勯幇顓炰化闂佹悶鍎洪崜锕€螞閹达附鐓曢悗锝呭缁夘喚鈧娲橀悷褔骞忛悩缁樺殤妞ゆ帊鑳剁粔铏繆閵堝洤啸闁稿鍋涚叅婵☆垱浜介埀顒佸浮閹虫粓鎮界喊妯荤亙闂佽鍑界紞鍡涘磻閸涘瓨鍋傛繛鍡樻尰閻撶喖鏌曟繛鍨姎妞ゅ繈鍊濋弻宥堫檨闁告挻姘ㄩ崚鎺撴償閵娿儲鐎梺褰掓？閻掞箓宕甸崶顒佺厵閻庣數枪瀛濆銈忕到閵堟悂寮诲澶娢ㄩ柨鏂垮⒔閻ｆ椽姊洪幖鐐插Ω闁告梹鍨垮畷褰掑箚瑜夐崼顏堟煕閹扳晛濡介柡瀣⒔缁辨捇宕掑顒佹闂佹悶鍔屽ḿ鈩冧繆鐎涙ê绶為柟閭﹀墰娴煎鈹戦悩缁樻锭妤楊亝鎸冲畷顖濈疀濞戞瑢鎷婚梺绋胯閸婃洟寮搁弮鍫熺厓鐟滄粓宕滈妸鈺佺闁跨噦鎷�


闂傚倸鍊搁崐鍝モ偓姘煎弮瀹曟繈骞掗弮鍥″銈嗗笒鐎氼剛鈧艾顦遍埀顒€绠嶉崕閬嶅箠鎼搭煉缍栭柕鍫濐槹閻撴洟鏌ㄥ┑鍡楁殭濠碘€炽偢閹粙顢涘顓炴灎閻庤娲樼换鍌炲煡婢跺﹦鏆﹂柛銉㈡櫓濡查绱撻崒姘偓鎼佸疮椤栫偛鍨傜憸鐗堝笚閸嬬喐銇勯弽顐沪闁绘帡绠栭弻鏇熺箾閸喖濮庨梺璇叉唉椤曆嗗絹闂佹悶鍎荤徊鑺ユ櫠閹绘崡褰掓偂鎼淬垹娈楅悗瑙勬穿缂嶄線銆侀弮鍫濈妞ゅ繐娲ㄧ粻鏌ユ⒒娴ｈ櫣甯涢柣妤佹礀閻ｇ兘顢楅崒婊呭闂佺粯鍔﹂崜娆擃敋鏉堛劍鍙忔慨妤€妫楁晶顖炴煕閻樺弶鍤囬柡宀€鍠撻埀顒佺⊕宀ｆ寧鏅堕浣虹瘈闁逞屽墯閹峰懘宕烽娑欑亙闂備線鈧偛鑻晶浼存煃瑜滈崜婵嬶綖婢跺⿴娼╅柕濞垮妷閸欓箖姊绘担鍛婂暈閻㈩垱甯掕灋婵炴垶菤閺嬫棃鏌熺€涙ḿ濡囬柡瀣墵閺屾洘绻涢崹顔煎闂佸搫鍊甸崑鎾斥攽閻愬瓨缍戦柛姘儔閹虫繃銈ｉ崘銊х枀闂佸憡鍔橀ˉ鍡欐喆閸曨剙顎撶紓浣圭☉椤戝棛绱炲畝鍕拺闂傚牊绋掗敍鏃堟煙閸戙倖瀚�
濠电姵顔栭崰妤冩崲閹版澘绠柨鐕傛嫹婵犵數鍎戠徊钘壝洪悩璇茬婵犻潧娲ら閬嶆煥閻曞倹瀚�闂傚倸鍊搁崐绋棵洪悩璇茬；闁瑰墽绮崑锟犳煛閸ユ湹绨奸悗姘炬嫹 1 缂傚倸鍊风粈渚€藝娴犲鍨傚ù鍏兼綑閸ㄥ倿骞栧ǎ顒€濡介柡鍜佸墴閺屾盯顢曢敐鍥╃暤闁汇埄鍨辨繛濠囧箖瑜版帒绠涙い鏍电稻缂嶅牓姊烘潪鎷屽厡闁稿鍊曢悾宄拔熼搹瑙勬畷闂侀€炲苯澧柍璇茬Ч婵＄兘濡搁敐鍕潖闂備礁鎼ú銊╁磻閻愬搫纾归柨鐕傛嫹濠电姵顔栭崳顖滃緤閻ｅ本宕查柟鐗堟緲妗呮繝銏ｅ煐閸旀洟鎯屽Δ浣典簻闁哄秲鍔庨幊浣虹磼閵婏附绶查摶鐐烘煛婢跺顕滄い銉︾矌閹插摜鏁钘夘伓10婵犵數鍋為崹鍫曞箹閳哄倻顩查柣鎰亪閸欓箖姊绘担鍛婂暈閻㈩垼浜獮蹇涙晸閿燂拷闂傚倷鐒︾€笛呯矙閹次诲洭顢橀姀鐘靛姦濡炪倖甯掗敃銉р偓姘炬嫹
    婵犵數鍎戠徊钘壝洪悩璇茬婵犻潧娲ら閬嶆煕濞戝崬鏋ゆい鈺冨厴閺屾稑鈽夐崡鐐差潾闁哄鏅滃Λ鍐蓟濞戞ǚ鏋庨煫鍥ㄦ尨閸嬫挻绂掔€ｎ亞鍔﹀銈嗗坊閸嬫捇鏌涢悩宕囥€掓俊鍙夊姇閳规垿宕堕埞鐐亙闁诲骸绠嶉崕鍗炍涘☉銏犵劦妞ゆ帒顦悘锔筋殽閻愬樊鍎旀鐐叉喘椤㈡棃宕ㄩ鐐靛搸婵犵數鍋犻幓顏嗗緤閹灐娲箣閻樺吀绗夐梺鎸庣箓閹峰宕甸崼婢棃鏁傜粵瀣妼闂佸摜鍋為幐鎶藉蓟閺囥垹骞㈤柡鍥╁Т婵′粙鏌ｉ姀鈺佺仩缂傚秴锕獮濠囨晸閻樿尙鐤€濡炪倖鎸鹃崑鐔哥閹扮増鈷戦柛锔诲帎閻熸噴娲Χ閸ヮ煈娼熼梺鍐叉惈閹冲氦绻氶梻浣呵归張顒傜矙閹烘鍊垫い鏂垮⒔绾惧ジ鏌￠崘銊モ偓绋挎毄濠电姭鎷冮崟鍨杹閻庢鍠栭悥鐓庣暦濮椻偓婵℃瓕顦抽柛鎾村灦缁绘稓鈧稒岣块惌濠偽旈悩鍙夋喐闁轰緡鍣ｉ、鏇㈡晜閽樺鈧稑鈹戦敍鍕粶濠⒀呮櫕缁瑦绻濋崶銊у幐婵犮垼娉涢敃銈夊汲閺囩喐鍙忛柣鐔煎亰濡偓闂佽桨绀佺粔鎾偩濠靛绀冩い顓熷灣閹寸兘姊绘担绛嬪殐闁哥姵鎹囧畷婵婄疀濞戣鲸鏅ｇ紓鍌欑劍宀ｅ潡鍩㈤弮鍫熺厽闁瑰鍎戞笟娑㈡煕閺傚灝鏆ｉ柡宀嬬節瀹曟帒顫濋鐘靛幀缂傚倷鐒﹂〃鍛此囬柆宥呯劦妞ゆ帒鍠氬ḿ鎰磼椤旇偐绠婚柨婵堝仱閺佸啴宕掑鍗炴憢闂佽崵濞€缂傛艾鈻嶉敐鍥╃煋闁割煈鍠撻埀顒佸笒椤繈顢橀悩顐ｎ潔闂備線娼уú銈吤洪妸鈺佺劦妞ゆ帒鍋嗛弨鐗堢箾婢跺娲寸€规洏鍨芥俊鍫曞炊閵娿儺浼曢柣鐔哥矌婢ф鏁Δ鍜冪稏濠㈣埖鍔栭崑锝夋煕閵夘垰顩☉鎾瑰皺缁辨帗娼忛妸褏鐣奸梺褰掝棑婵炩偓闁诡喗绮撻幐濠冨緞婢跺瞼姊炬繝鐢靛仜椤曨厽鎱ㄦィ鍐ㄦ槬闁哄稁鍘奸崹鍌炴煏婵炵偓娅嗛柛瀣ㄥ妼闇夐柨婵嗘噹閺嗙喐淇婇姘卞ⅵ婵﹥妞介、鏇㈡晲閸℃瑦顓婚梻浣虹帛閹碱偆鎹㈠┑瀣祦閻庯綆鍠栫粻锝嗙節婵犲倸顏柟鏋姂濮婃椽骞愭惔锝傛闂佸搫鐗滈崜鐔风暦閻熸壋鍫柛鏇ㄥ弾濞村嫬顪冮妶鍡楃瑐闁绘帪绠撳鎶筋敂閸喓鍘遍梺鐟版惈缁夋潙鐣甸崱娑欑厓鐟滄粓宕滃顒夋僵闁靛ň鏅滈崑鍌炴煥閻斿搫孝閻熸瑱绠撻獮鏍箹椤撶偟浠紓浣插亾濠㈣泛鈯曡ぐ鎺戠闁稿繗鍋愬▓銈夋⒑缂佹ḿ绠栭柣鈺婂灠閻ｇ兘鏁撻悩鑼槰闂佽偐鈷堥崜姘额敊閹达附鈷戦悹鍥ｂ偓铏亖闂佸憡鏌ㄦ鎼佸煝閹捐绠ｉ柣鎰綑椤庢挸鈹戦悩璇у伐闁哥噥鍨堕獮鍡涘磼濮ｎ厼缍婇幃鈺呭箵閹烘繂濡锋繝鐢靛Л閸嬫捇鏌熷▓鍨灓缁鹃箖绠栭弻鐔衡偓鐢登瑰暩閻熸粎澧楅悡锟犲蓟濞戙垹绠抽柡鍌氱氨閺嬪懎鈹戦悙鍙夊櫣闂佸府绲炬穱濠囧箻椤旇姤娅㈤梺璺ㄥ櫐閹凤拷

闂佽娴烽弫濠氬磻婵犲洤绐楅柡鍥╁枔閳瑰秴鈹戦悩鍙夋悙婵☆偅锕㈤弻娑㈠Ψ閵忊剝鐝栭悷婊冨簻閹凤拷  闂傚倷鑳舵灙缂佺粯顨呴埢宥夊即閵忕姵鐎梺缁樺姉閸庛倝宕曞畝鍕厽闁逛即娼ф晶顔姐亜鎼搭垱瀚�  闂備浇宕垫慨鏉懨洪妶鍥ｅ亾濮樼厧鐏︽い銏＄懇楠炲鏁冮埀顒傜矆閸曨垱鐓熸俊顖濐嚙缁茶崵绱撳蹇斿  闂傚倷鑳堕幊鎾诲触鐎ｎ剙鍨濋幖娣妼绾惧ジ鏌曟繛鐐珔闁告濞婇弻鈩冨緞鐎ｎ亞鍔稿┑鈽嗗灲閹凤拷