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编号:13473547
止痛顺气胶囊对慢性萎缩性胃炎模型大鼠JAK/STAT信号通路的影响(3)

     2.4 大鼠胃黏膜组织中JAK1、STAT3、SOCS-3、c-Myc mRNA表达水平检测

    采用实时荧光定量-PCR法。取大鼠胃黏膜组织适量,剪碎、研磨、冰上裂解,使用Trizol法提取总RNA,用紫外分析仪验证RNA浓度和纯度。然后将mRNA逆转录为cDNA,以cDNA为模板进行PCR扩增。反应体系:SYBR荧光染料10 μL,上、下游引物各2 μL,cDNA模板4 μL,无核酸酶水2 μL。引物序列:GAPDH上游为5′-TTCATGGCCATCAGGATG-3′,下游为5′-TAGGCTAGCTTAAGCCTT- 3′,扩增片段长度为421 bp;JAK1上游为5′-CCATGCCTTACTTGATCA-3′,下游为5′- CCTACGTCGAGGTTTCAG-3′,扩增片段长度为162 bp;STAT3上游为5′-CTCGGACTAACGATACGT-3′,下游为5′-GATCACTTGCCATCAGTA-3′ ......
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