2.3 木香烃内酯对SK-BR-3细胞凋亡的影响考察

    取对数生长期的SK-BR-3细胞，以1×104个/孔的密度接种于12孔板中，每孔加入1 mL完全培养基，于细胞培养箱中培养24 h后弃去培养基，将细胞分为空白对照组和木香烃内酯10、20、30 μmol/L浓度组[前期试验发现木香烃内酯高浓度下(40～50 μmol/L)细胞大量死亡漂浮，贴壁细胞较少，故选择10、20、30 μmol/L进行试验]。空白对照组加入完全培养基1 mL，试验组分别加入终浓度为10、20、30 μmol/L的木香烃内酯培养液，每组设5个复孔，然后培养48 h后，弃去培养基，于4 ℃下用4%多聚甲醛溶液固定30 min;用PBS洗涤细胞2次，每次3～5 min;加入500 μL Hoechst 33258染色液，室温避光染色10 min，吸除染色液，用PBS洗涤2次，每次3～5 min;然后置于倒置荧光显微镜下观察，每孔随机选择5个视野拍照。镜下可见，凋亡细胞的荧光强度比正常细胞要高 ......