基于Calpain-ERK信号通路研究Calpeptin对雌激素诱导人乳腺上皮细胞MCF-10A转化及干性标志物表达的影响(3)
1.3 细胞人乳腺上皮细胞MCF-10A由陆军军医大学生物化学教研室馈赠。
2 方法
2.1 细胞培养
将人乳腺上皮细胞MCF-10A培养于DMEM/F12全培养基中(含有10%马血清、10 ng/mL霍乱毒素、50 ng/mL氢化可的松、10 μg/mL胰岛素、20 ng/mL EGF以及1%青链霉素,下同),在37 ℃、5%CO2的培养箱(后文条件相同)中进行培养,每48 h更换1次培养液。
2.2 細胞转化试验
将乳腺上皮细胞MCF-10A随机分为对照组、E2转化组(DMSO终体积分数为0.1%,下同)和E2转化+Calpeptin组(DMSO终体积分数为0.1%,下同)。3组细胞分别以0.1%DMSO、E2(50 nmol/L)、E2(50 nmol/L)+Calpeptin(1 μmol/L)连续处理15代,每次传代时均加入相应药物处理,然后按照“2.1”项下条件进行培养 ......
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