基于Calpain-ERK信号通路研究Calpeptin对雌激素诱导人乳腺上皮细胞MCF-10A转化及干性标志物表达的影响(4)
取对数生长期的E2转化细胞,随机分为对照组(含0.1%DMSO)和U0126(ERK抑制剂)组(10 μmol/L)。分别按“2.4”项下方法检测细胞的克隆形成能力,按“2.5”项下方法检测细胞自我更新能力,按“2.7”项下方法检测细胞中CD44、Nanog、OCT4和p-ERK蛋白的表达情况(以α-tubulin为内参,稀释比例为1 ∶ 10 000)。试验均重复3次。2.9 统计学方法
采用SPSS 11.5软件对数据进行统计处理和分析。数据以x±s表示。多组间比较采用单因素方差分析,两独立样本组间比较采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
3 结果
3.1 Calpeptin对E2转化细胞形态学特征的影响
细胞形态学观察发现,与对照组比较,E2转化组细胞形态发生了明显变化,细胞呈长梭形贴壁生长,细胞体积变大,具有一定的间质细胞样特征;E2转化+Calpeptin组细胞形态与对照组接近。各组细胞形态学特征显微图见图1。
3.2 Calpeptin对E2转化细胞增殖能力的影响
培养24、48 h后 ......
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