岭南山竹子醇提物对LPS致RAW264.7细胞炎性损伤的保护作用研究(3)
2 方法2.1 GOEE的制备
取新鲜岭南山竹子果皮(80 g)切成片,用70%乙醇(0.8 L)回流提取3次,每次2.5 h。将提取液过滤并减压浓缩后,冷冻干燥,即得到GOEE冻干品5.26 g,得率为6.58%。
2.2 GOEE中总多酚与总黄酮的含量测定
采用Folin-Ciocalteau法[13]测定GOEE中的总多酚含量,以没食子酸为指标,结果以没食子酸含量表示;采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法[14]测定GOEE中总黄酮的含量,以芦丁为指标,使用紫外-可见分光光度计在500 nm波长处检测样品含量,方法学考察内容及其结果见相关文献[13-14]。每样品均重复测定3次。
2.3 细胞培养
将对数生长期的细胞接种于含10%胎牛血清、1%青链霉素双抗的高糖DMEM培养基中,并置于5%CO2、37 ℃的培养箱中培养(培养条件下同)。
2.4 GOEE对LPS诱导RAW264.7细胞的毒性研究
采用MTT法检测。取对数生长期的RAW264.7细胞以5×104个/mL接种于96孔板中 ......
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