岭南山竹子醇提物对LPS致RAW264.7细胞炎性损伤的保护作用研究(1)
中圖分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2020)14-1719-07DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.14.11
摘 要 目的:探讨岭南山竹子70%乙醇提取物(GOEE)对脂多糖(LPS)致RAW264.7细胞炎性损伤的保护作用及其潜在分子机制。方法:取岭南山竹子果皮用70%乙醇回流提取,制得GOEE。采用Folin-Ciocalteau法和紫外-可见分光光度法分别测定GOEE中总多酚和总黄酮的含量。采用MTT法检测不同剂量GOEE的细胞毒性;以LPS诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症模型,分别以地塞米松、N-乙酰基-L-半胱氨酸为阳性对照,采用Griess法和2′,7′-二氯荧光素法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)和细胞中活性氧(ROS)的含量;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平;采用Western blotting法测定细胞中p65蛋白(p65)、磷酸化p65(p-p65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)、血红素加氧酶-1(HO-1)以及细胞核内核因子E2相关因子2(NRF2)蛋白的表达水平 ......
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