2.5 当归挥发油对H9C2细胞上清液中LDH活性的影响

    采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测。取对数生长期的H9C2细胞，按“2.4”项下方法制备细胞悬液后，以1×104个/孔接种于96孔板中，每孔100 μL。将细胞随机分为空白组、模型组(H/R组)、H/R+药物组(给药浓度参考“2.4”项下结果，下同)，每组设置3个复孔。空白组不作任何处理;H/R组、H/R+药物组先参照“2.3”项下方法建立H/R损伤模型，药物组再给予相应药物。培养适宜时间(时间参考“2.4”项下结果，下同)后，收集各组细胞上清液。参照相应试剂盒说明书，采用多功能酶标仪于450 nm波长处检测并计算LDH活性。LDH活性越高，则细胞自噬水平越高[5]。上述试验重复3次。

    2.6 当归挥发油对H9C2细胞自噬水平的影响

    采用MDC法检测。取对数生长期的H9C2细胞，按“2.4”项下方法制备细胞悬液后，以5×103个/孔接种于96孔板中，每孔100 μL。将细胞随机分为空白组、模型组(H/R组)、H/R+药物组(终浓度同“2.5”项)、H/R+自噬抑制剂组(3-MA终浓度为5 mmol/L[16]) ......