2.3 SFI对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应的干预作用考察

    2.3.1 细胞中HMGB1定位观察 采用免疫荧光法检测。参照文献方法[10]制作细胞炎症模型，将灭菌盖玻片置于24孔板(每孔含培养基0.5 mL)中，取对数生长期细胞，按2×104个/孔滴加至各孔盖玻片上，培养24 h后，将细胞随机分为空白对照组、LPS组、阳性对照组(RGFP966，最终浓度为10 μmol/L[11])和SFI低、中、高剂量组(剂量设置参考“2.2”项下结果)，空白对照组加入含双抗、不含血清的DMEM高糖培养基(以下简称“完全培养基”)0.5 mL，LPS组加入含0.2 μg/mL LPS的完全培养基0.5 mL，各给药组先加入等量LPS培养30 min后再加入含相应药物的完全培养基0.5 mL，每组设3个复孔。细胞培养24 h后，用4 ℃预冷的PBS清洗，置于4%多聚甲醛溶液中室温固定20 min;用PBS清洗3次，加入0.5% TritonX-100试剂适量，室温反应20 min;用PBS清洗5 min×3次 ......