基于SIRT1/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路研究右美托咪定对脓毒症模型大鼠脑损伤的保护机制(3)
CLP+Dex+Sirtinol组大鼠于造模前2 h经侧脑室注射抑制剂Sirtinol,具体操作方法[12]如下:采用2%戊巴比妥钠(0.1 mL/100 g)腹腔注射将大鼠麻醉,将其固定在脑立体定位仪上,以75%乙醇消毒后暴露颅骨和前囟的位置,将前囟作为中心点,向右侧旁开1.0 mm,向后面开1.6 mm,用小颅钻磨1个骨孔,在骨孔处将微量注射器垂直进入深度约3.6 mm处,以0.5 μL/min的速度注射Sirtinol(剂量为2 μL/100 g;以0.5% DMSO溶液配成浓度为2 mmol/L的溶液,于4 ℃保存,使用前加热至37 ℃使其成透明水样物)[13]。注射完毕,将注射器停留约5 min,随后注射器每向上拔出1 mm停留5 min,完全拔出后用骨蜡将骨孔封闭。处理大鼠手术伤口,麻醉未醒前给予电热毯保暖。造模结束0、3、6 h后,CLP+Dex组、CLP+Dex+Sirtinol组大鼠分别腹腔注射Dex(剂量为10 μg/kg)[13],Sham组、CLP组大鼠同法注射等体积的生理盐水。
2.2 指标检测
2.2.1 大鼠脑组织含水量 采用经典干湿质量法进行检测 ......
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