2.3 肝组织病理学观察

    取固定于组织固定液中的肝组织适量，经常规石蜡包埋后切片(厚度约4 μm)，分别用HE、油红O染色后，置于显微镜下观察其病理学变化。

    2.4 血清和肝组织生化指标检测

    取血清样品和冻存的肝组织样品各适量，按照试剂盒方法(酶法)以酶标仪检测各组小鼠血清中AST、ALT水平以及血清和肝组织中TC、TG水平，严格按照相应试剂盒说明书操作。

    2.5 肝组织中NF-κB p65、TNF-α、IL-6蛋白表达情况的检测

    采用Western blotting法检测。取冻存的肝组织适量，加入适量蛋白裂解液和蛋白酶抑制剂，超声(频率：20 kHz，功率：750 W)10 s破碎，冰浴裂解0.5 h，以1 000 r/min离心8 min，取上清液，用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白含量。取蛋白于95 ℃加热变性5 min，取变性后的蛋白样品120 μg行SDS-PAGE后，转移至PVDF膜上，用5%脱脂牛奶封闭1 h;分别加入NF-κB p65、TNF-α、IL-6一抗(稀释度均为1 ∶ 1 000)，于 4℃孵育过夜;用TBST溶液清洗8 min×3次，加入二抗(稀释度为1 ∶ 3 000)和GAPDH抗体(稀释度为1 ∶ 8 000) ......