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编号:458240
龙胆环烯醚萜类成分对NAFLD细胞模型脂质积累及炎症的改善作用及机制Δ
http://www.100md.com 2022年10月14日 中国药房 2022年第19期
批号,试剂盒,1材料,1主要仪器,2药品与试剂,3细胞,2方法,1GI的提取,2细胞培养,3HepG2细胞活力的检测,4HepG2细胞脂滴形成情况观察,5HepG2细胞内TG含量的检测,6
     王丽娟,翁丽丽,肖春萍,于 前,寇柏鑫(长春中医药大学药学院,长春 130117)

    非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种临床病理综合征。随着人们生活水平的提高,NAFLD的发病率也大幅增加,据2019年流行病学数据统计,NAFLD的全球患病率高达25%[1]。脂质积累作为NAFLD的主要特征,通常出现在疾病发展的早期,其引起的炎症反应也是NAFLD的另一个主要特征[2―3]。脂肪在肝脏的过度累积可活化核因子κB抑制蛋白α(nuclear factor-κB inhibitory protein α,IκBα),激活NF-κB信号通路,促进肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6等炎症因子的释放,从而产生炎症[4]。脂质积累及其引起的炎症反应若在疾病早期及时干预是可以逆转的,但如果不进行干预,后期可能发展为肝硬化或肝癌,严重危及患者生命健康[5]。目前治疗NAFLD主要依靠药物或者机体的自身调节作用,但药物副作用较大且患者依从性较差[6]。因此,有必要寻找新的治疗NAFLD的药物。

    龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshuricaKitag.、龙胆G.scabraBge.、三花龙胆G.trifloraPall.或坚龙胆G.rigescensFranch.的干燥根及根茎,具有清热燥湿、泻肝胆火的功效,临床上含有龙胆的方剂主要用于保肝,且疗效较好[7―8]。环烯醚萜苷类化合物为龙胆的主要成分,具有多种药理活性,如保肝、降脂、抗炎和利胆作用[9―10]。但是,龙胆环烯醚萜类成分(gentian iridoids,GI)是否可改善NAFLD尚不明确。基于此,本研究首先以D101大孔树脂柱分离GI,然后以游离脂肪酸诱导的人肝癌HepG2细胞为NAFLD细胞模型[11],初步探讨GI对NAFLD的改善作用及机制,以期为NAFLD治疗药物的开发提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有TM3型二氧化碳细胞培养箱、Multiscan MK3型酶标仪、QuantStudioTM5型实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪、IBright FL1000型智能凝胶成像系统(美国Thermo Fisher Scientific公司),810R型离心机(德国Eppendrof公司),Discovery V20型倒置荧光显微镜(德国Zeiss公司) ......

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