张 艺 ，郭 芬 (1.咸宁市中心医院/湖北科技学院附属第一医院呼吸与危重症医学科，湖北 咸宁 437100；.湖北科技学院临床医学院医学实验实训中心，湖北 咸宁 437100)

    肺癌是癌症致死的首要原因，其中约85%的肺癌为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，严重影响人类健康[1]。近年来，表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)编码基因分型的鉴定和EGFR 酪氨酸激酶抑制剂(EGFR tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs)靶向药物的发展，极大地改变了EGFR基因突变晚期NSCLC患者的治疗结局[2]。然而，几乎所有的EGFR基因突变阳性患者都会在治疗1 年内对EGFR-TKIs 产生获得性耐药[3]，故探寻能够预防或克服EGFR-TKIs 耐药的治疗方案成为该领域的主要研究方向。

    近期研究证实，某些天然药物成分可通过不同的信号通路来推迟或阻止EGFR-TKIs耐药的发生[4]。雷公藤甲素(triptolide，TPL)是从中药雷公藤中提取分离的一种二萜类化合物，具有显著的抗肿瘤活性，且在逆转化疗药物耐药方面具有一定潜力[5—6]，然而其具体机制尚不清楚。既往有研究证实，TPL可调节多种生物学过程关键蛋白的表达，且与磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，又称Akt)通路的关系尤其密切[7]；同时，PI3K/Akt通路与EGFR-TKIs 耐药的发生密切相关[8]。为此，本课题组基于PI3K/Akt 通路，以耐药细胞为对象，初步探索TPL 对第一代EGFR-TKIs 吉非替尼获得性耐药的抑制作用及潜在机制，旨在为进一步阐明TPL 的药理作用提供参考，亦为预防或逆转EGFR-TKIs 耐药提供候选治疗策略。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括BD Accuri C6 型流式细胞仪(美国BD Biosciences 公司)、XBQ-2H 型细胞培养仪(上海佐研仪器科技有限公司)、LD-96A型酶标仪(山东莱恩德智能科技有限公司)等。

    1.2 主要药品与试剂

    TPL对照品(批号111567-202005，纯度≥98%)购自中国食品药品检定研究院；吉非替尼片(批号211102，规格0.25 g)购自日本Kagamiishi Plant ......