达原饮对RSV寒湿郁肺证小鼠肺部损伤和肠道菌群的影响Δ
厚壁,菌门,外周血,1材料,1主要仪器,2主要药品与试剂,3病毒毒株与细胞,4实验动物,2方法,1达原饮制备,2RSV扩增,3RSV半数细胞培养物感染量的测定,4小鼠分组,给药与造模,5标本采集与处理,6
张 茹 ,杜海涛 ,王晓雪 ,王 仪 ,周 倩 ,刘善新 ,王 平 #(.山东中医药大学药学院,济南 50355;.山东省中医药研究院,济南 5004)呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)属副黏病毒科,是引起婴幼儿下呼吸道感染的常见病原体之一[1]。对于RSV 的防治,目前世界范围内尚无特异性药物和疫苗。中医药治疗病毒感染具有多成分、多途径、多靶点的独特优势,其不仅针对某一特定病毒,而且可就病因病机进行辨证论治。RSV 感染属中医“疫病”范畴,有证据表明在寒湿环境下,机体对RSV 的易感性有所增加[2]。达原饮源自《温疫论》,由槟榔、厚朴、草果、知母、芍药、黄芩、甘草7味药组成,可开达膜原、辟秽化浊,治疗疟疾、瘟疫邪伏膜原等病证。现代药理学研究表明,达原饮具有抗病毒、解热、抗炎等多种药理作用,可用于治疗呼吸道病毒感染导致的肺部损伤[3-5]。
“肺与大肠相表里”是中医藏象学的经典理论之一。临床调查发现,呼吸道病毒在引发肺部损伤的同时,还会导致患者肠道菌群失衡,出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻等胃肠道症状[6]。益生菌混合物能通过调节肠道菌群的组成来调控肺泡巨噬细胞分泌干扰素β,从而有效防治RSV 引起的肺部病变[7]。可见,肠道菌群的改变对呼吸道病毒感染的发生、发展和治疗起重要作用。
为了更好地贴合RSV 流行时的气候条件,符合“寒湿疫”的中医证候表现,本研究拟采用“寒湿造模+RSV感染”的方式建立RSV 寒湿郁肺证小鼠模型,同时在前期药效学实验的基础上,通过16S rDNA 技术探索达原饮对模型小鼠肠道菌群的影响,从而阐明其潜在作用机制,为中医药治疗RSV感染提供实验依据。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器包括TC20TM型细胞计数仪、XJ-023型酶标仪(美国Bio-Rad公司),FACSAria Ⅲ型流式细胞仪(美国BD 公司),X-30R 型全能高速冷冻离心机(美国Allegra公司),A200型基因扩增仪(杭州朗基科学仪器有限公司),EPS300型电泳仪、Tanon-2500型凝胶成像仪(上海天能生命科学有限公司),NovaSeq 6000系统测序仪(美国Illumina公司),2100型生物分析仪(美国Agilent公司)等。
1.2 主要药品与试剂
槟榔、厚朴、草果、知母、白芍、黄芩、甘草饮片均购自山东建联盛嘉中药有限公司,经山东省中医药研究院周倩研究员鉴定,分别为棕榈科植物槟榔ArecacatechuL.的干燥成熟种子 ......
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