硝化应激对小鼠肝原代细胞损伤及机制研究(1)
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【摘要】目的：观察硝化应激重要硝化剂过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对肝原代细胞的体外损伤作用及机制研究。方法：通过不同浓度ONOO-供体SIN-1作用于肝原代细胞24h，探索SIN-1的有效作用剂量，同时加入ONOO-清除剂FeTMPyP处理确认是否是ONOO-对肝原代细胞产生影响。将肝原代细胞分为Control组，SIN-1作用组和ONOO-清除剂组，用MTT法分别检测各组肝细胞存活率，LDH检测细胞坏死情况，Western Blot法检测细胞内ONOO-生成印记蛋白——3-硝基酪氨酸(3-NT或NT)表达情况。结果：200μM的SIN-1刺激24h使肝细胞存活率明显下降，同时检测该浓度下的肝细胞培养基中LDH的活性发现也明显升高。WB结果显示SIN-1组细胞NT蛋白表达明显升高。结论：ONOO-能够介导肝细胞硝化应激，造成原代肝细胞的损伤。
【关键词】硝化应激；肝原代细胞；过氧亚硝基阴离子
【中图分类号】R453【文献标识码】A【文章编号】1004-4949(2013)12-221-02
硝化应激(NitrativeStress)[1]指机体内活性氧簇与活性氮簇共同生成增加时导致机体内产生大量的硝化能力极强的一类硝化物质，如过氧亚硝基阴离子等等，进而对机体内的一些蛋白质产生硝化作用或者对细胞的核酸物质产生硝化作用，进而引起一些的机体的病理变化。研究发现，病理情况下，在体内产生过量的超氧阴离子等氧化物质的同时体内体内诱导型一氧化氮合酶表达及活性增加，催化产生大量NO；NO与氧化应激反应的产物超氧阴离子(O2-)结合后产生过氧亚硝基阴离子(Peroxynitrite ......
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