【摘要】

    【目的】构建、表达并纯化含有蛋白转导结构域TAT的黑色素瘤相关基因MAGE-A3融合蛋白TAT-MAGE-A3-EGFP，并观察其生物学功能，【方法】1)构建质粒pET28a-TAT-MAGE-A3-EGFP、对照组pET28a-MAGE-A3-EGFP和pET28a-TAT-EGFP原核表达载体，在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达，经SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定并通过Ni+柱纯化获得TAT-MAGE-A3-EGFP、MAGE-A3-EGFP、TAT-EGFP三种融合蛋白；2)动态荧光显微镜观察MAGE-A3、TAT-MAGE-A3-EGFP、TAT-EGFP三种融合蛋白在细胞中的不同分布，流式细胞术观察三种融合蛋白穿膜效率的差异。

    【结果】1)成功构建了pET28a-TAT-MAGE-A3-EGFP、pET28a-MAGE-A3-EGFP和pET28a-TAT-EGFP原核表达载体，并获得了TAT-MAGE-A3-EGFP、MAGE-A3-EGFP和TAT-EGFP融合蛋白 ......