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编号:13182543
广西菲牛蛭药材的高效毛细管电泳指纹图谱研究
http://www.100md.com 2012年2月15日 姜新刚 孟作环 贾继明
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    参见附件。

     [关键词]高效毛细管电泳;指纹图谱;菲牛蛭

    菲牛蛭Poecilobdella manillensis别名马尼拟医蛭,俗称金边蚂蝗,隶属于无吻蛭目、医蛭科、牛蛭属,主要分布于广西、广东、海南和福建等省区[1],野生资源丰富并且可以进行人工养殖[2],其具有显著的抗凝血、抗血栓、溶栓、抗血小板聚集活性[3-5],主要化学成分为脂肪酸、氨基酸和蛋白质[6-7],其中以报道的活性成分为菲牛蛭素A和菲牛蛭素B[7] 、水蛭素P6、水蛭素P18[8],迄今为止作者未见任何关于指纹图谱的报道,高效毛细管电泳技术广泛应用于脂肪酸、氨基酸和蛋白质的分离、分析、鉴定,所以本实验采用高效毛细管电泳法对菲牛蛭药材进行了指纹图谱研究,并同时对其抗凝血酶活性进行了测定。

    1.仪器与试药

    Beckman Coulter P/ACETM MDQ毛细管电泳仪(美国BECKMAN COULTER公司),配有PDA检测器与控温系统,仪器控制与数据采集通过Beckman 32 Karat 5.0工作站进行;未涂层石英毛细管(75 μm×56 cm,河北永年锐沣色谱器件有限公司);PH计(PHS-3C,上海精密科学仪器有限公司);KQ5200B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);分析天平(AG135,METTLER TO-LEDO);LXJ-ⅡB低速大容量多管离心机(上海安亭科学仪器厂);定时可调速漩涡混合器(XW-01,上海医大仪器厂);恒温水浴锅(DK-S26,上海精宏实验设备有限公司)。

    磷酸氢二钠(分析纯,批号 1200645,天津市科密欧化学试剂有限公司);三羟甲基氨基甲烷(Tris,纯度≥99.9%,批号 1004053,河北博海生物工程开发公司);十二烷基硫酸钠(SDS,分析纯,批号 1003032,河北博海生物工程开发公司);氢氧化钠(分析纯,批号 20100621,北京化工厂);盐酸(分析纯,批号 20100128,北京化工厂);甲醇(色谱级,Fisher);实验用水为超纯水。

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