散癖平胃方含药血清对人胃癌细胞SGC—7901基因表达的影响与验证
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[摘要]目的：研究散癖平胃方(SPPW)对人胃癌细胞SGC-7901基因表达谱的影响，利用实时定量PCR( Real-time quantitative PCR，RT-PCR)对相关基因加以验证。方法：24只SD大鼠随机分为4组，每组6只，分别给予SPPW方高、中、低剂量(中剂量组相当于人临床等效剂量，按18.5 g·kg-1·d-1给药，高剂量与低剂量则分别为中剂量组的2倍及1/2倍)及等剂量生理盐水(阴性对照组)灌胃给药，每日早晚各1次，每次2 mL，连续3 d。SPPW方组及阴性对照组在末次给药2 h后行水合氯醛麻醉，无菌条件下腔静脉取血，制备阴性对照组及SPPW方高、中、低剂量组大鼠含药血清。分别将SPPW方中剂量组含药血清及阴性对照组含药血清加入对数生长期胃癌细胞SGC-7901中(体积为培养液的10%)， 24 h后提取胃癌细胞SGC-7901 mRNA，使用基因芯片技术筛选出SPPW方含药血清作用后表达有差异的基因。将高、中、低含药血清干预24 h后的人胃癌细胞SGC-7901提取总RNA的提取，使用RT-PCR验证涉及肿瘤增殖，凋亡及生长等相关基因。结果： 基因芯片筛选出203个差异表达基因，上调141个，下调62个，涉及MAPK信号通路，Wnt信号通路， AK/STAT信号传导通路，VEGF信号通路及其他多种代谢通路。与阴性对照组相比，SPPW组STAT2 mRNA减少 (P<0.05)，MnSOD2，NDRG1，BNIP3 mRNA增加(P<0.05)。结论： RT-PCR证实SPPW含药血清显著下调STAT2表达，显著上调MnSOD2，NDRG1和BNIP3表达，从而在基因水平上探讨了SPPW方的抗癌作用及其具体机制。
[关键词]胃癌；基因芯片；实时定量聚合酶链反应
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