半夏悬浮培养细胞的EMS诱变和耐高温突变体筛选(2)
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参见附件。
2.3试管苗羟脯氨酸间接胁迫筛选和高温直接胁迫处理半夏悬浮培养细胞经过0.4%EMS诱变处理1 h，再生培养基中诱导形成试管苗，经6 mmol·L-1羟脯氨酸间接胁迫。将筛选成活的试管苗在30 ℃的温度胁迫下12 d后，植株生长良好。在35 ℃的高温胁迫下12 d，部分试管苗叶片枯萎，但是多数植株仍然存活。
取在各个温度梯度下存活的半夏试管苗叶片，测叶片内脯氨酸的含量。经EMS诱变处理和羟脯氨酸选择后的植株，在25 ℃时，叶片内脯氨酸的含量几乎没有变化。30，35 ℃时，存活半夏试管苗叶片内脯氨酸的含量随着胁迫时间的增加而升高(图2)。
2.4移栽苗人工气候箱高温胁迫处理选取经过诱变和35 ℃高温胁迫存活下来的半夏试管苗进行继代扩繁培养后移栽到花盆中作为试验组，在人工气候箱中进行高温胁迫处理(以移栽成活的未经诱变处理的半夏试管苗为对照组)。对照组盆栽苗35 ℃胁迫处理第3天时，植株的叶片和叶柄已有枯黄色斑出现；第5天时，叶片和叶柄几乎全部枯黄，图2高温胁迫后半夏叶片内脯氨酸含量的变化
Fig.2Changes of proline concentrations in leaves of Pinellia ternata under heat shock treatment
出现倒苗现象 ......
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