鱼腥草抗补体活性多糖的制备工艺研究(1)
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[摘要]目的：建立鱼腥草中抗补体活性多糖的整套制备工艺。方法：以多糖得率和经典抗补体活性为综合指标，利用正交试验确定鱼腥草活性多糖的最佳提取工艺和最佳醇沉条件；以蛋白清除率和多糖保留率为综合指标，进行三氯乙酸法除蛋白工艺优化；以色素去除率和多糖损失率为综合指标，利用正交试验优化最佳脱色工艺。 结果：最佳制备工艺为于50倍水、90 ℃下煎煮3次、每次2 h；将提取液浓缩至相当于每毫升0.12 g生药，加入4倍体积的90%乙醇，静置24 h；离心去上清液，沉淀依次用无水乙醇、丙醇、无水乙醚洗涤，再用水复溶，于复溶液中加入三氯乙酸至终浓度为20%除蛋白；于50 ℃，pH 3.0，3%活性炭下吸附50 min脱色。采用该工艺制备三批鱼腥草抗补体活性多糖，多糖得率平均为4.03%(RSD 0.96%)，糖质量分数平均为80.97%(RSD 1.5%)，蛋白质量分数平均为2.02%(RSD 2.3%)，补体抑制活性的CH50平均为0.079 g·L-1(RSD 3.6%)。结论：本实验系统建立的工艺稳定可靠，所得多糖的糖含量高、活性强，适合鱼腥草抗补体活性多糖的大量制备。
[关键词]鱼腥草；多糖；抗补体；提取；醇沉；除蛋白；脱色
补体系统是人体重要的免疫防御系统之一，但其过度激活会引起人体免疫系统的过度反应，造成人体自身正常组织的损伤，参与急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、老年性痴呆等多种重大疾病的病理过程[12]，目前临床上对补体系统过度激活相关疾病尚无理想的治疗药物。自然界中广泛存在具有抗补体作用的活性物质，包括多糖、黄酮、甾体、三萜、生物碱、蛋白质等多种类型[35]，从天然产物中寻找开发高效低毒的新型补体抑制剂越来越受到国内外学者的关注 ......
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