红景天苷对A—β—1～40所致阿尔茨海默病模型大鼠认知功能改善作用及机制探讨(2)
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2.5Western blot检测NFκB，iNOS和RAGE蛋白Morris水迷宫试验后处死大鼠，取另一侧大脑海马，经裂解、匀浆及4 ℃离心，提取蛋白，应用BCA法测定蛋白浓度。临用时取总蛋白量一致的各样品与5×SDS上样缓冲液混合均匀，100 ℃煮沸5 min，冰上冷却，上样于PAGE凝胶加样孔内，120 V恒压电泳至溴酚蓝达凝胶底部。半干电印迹恒流条件下将凝胶上蛋白转移至PVDF膜，5%的脱脂牛奶于37 ℃封闭1 h。将膜分别浸入相应抗体溶液，4 ℃结合过夜。TTBS溶液洗膜，将膜浸入辣根过氧化物酶标记的二抗溶液(1∶10 000)，37 ℃反应2 h，TTBS溶液洗膜，化学发光法显色。
2.6图像处理及统计学分析采用美国Kodak公司数码成像分析软件对Western印记显色区带的信号强度进行相对定量分析。数据采用SPSS 17. 0软件进行统计分析，计量资料以±s表示，组间资料应用单因素方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。
3结果
3.1定位航行试验观察大鼠在Morris水迷宫试验中找到并爬上平台的逃避潜伏期，结果见表1。在测试的5 d内所有大鼠的逃避潜伏期都呈下降趋势。AD模型组较假手术组逃避潜伏期明显延长(P<0.01)，显示由于给予Aβ1～40而导致学习记忆功能受损。红景天苷25 mg·kg-1组逃避潜伏期均值较模型组有所下降，但第1，2，5 天差异均未达统计学显著性。红景天苷50，75 mg·kg-1组逃避潜伏期各天均较模型组明显缩短(P<0.05，P<0.01)。
3.2空间探索试验观察撤台后大鼠在原平台象限活动时间与总时间比值及跨平台次数，结果见表2。与假手术组相比，AD模型组大鼠在原平台所在象限搜索时间所占比值明显降低(P<0.01)，搜索过程中跨过原平台所在位置的次数也显著减少(P<0 ......
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