附子与甘草不同配伍比例配伍减毒的实验研究(2)
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参见附件。
细胞培养48 h后加上述含药血清再作用48 h，弃上清液，每孔加100 μL的DMEM培养液和20 μL的MTT(5 g·L-1)，37 ℃，5%CO2培养箱培养4 h，弃上清液，加入DMSO 150 μL，振荡10 min，在570 nm检测各孔的吸收度(A)。存活率=( A各组细胞/A正常组)×100%。于心肌细胞内加入不同浓度含药血清，于物作用30 min，1，3，4 h，在5%CO2恒温罩内测定心率变化，每孔5个视野，每个视野计数1 min，计数心肌细胞搏动数。离心，取细胞上清液，全自动生化分析仪测定LDH含量。
2.4 统计学处理
实验数据均采用±s表示，使用SPSS软件进行统计处理，采用单因素方差分析。若P<0.01，两者有极显著性差异；若P<0.05，两者有显著性差异。
3 结果
3.1不同配伍比例甘草对附子急性毒性影响 单用附子灌胃给药后，中毒小鼠精神萎靡，口吐白沫，动物出现喘气，继而呼吸停止死亡，部分动物出现惊厥。动物死亡多在给药后3 h内，附子配伍甘草后中毒动物表现与单用附子类似。同单用附子比较，附子配伍甘草后配伍合煎液的半数致死剂量增加，附子甘草1∶3以最大给药量给药，10只小鼠死亡2只，未能够测出半数致死量，见表1。
3.2 不同配伍比例甘草对附子心脏毒性的影响 附子对大鼠的心脏毒性主要是心律失常，表现为异常的QRS波。附子配伍甘草后中毒动物毒性表现与单用附子相似。同单用附子比较，附子配伍甘草后能够提高附子心脏毒性的中毒剂量。附子配伍甘草1∶3最大剂量给药动物未出现心率失常，因而无法测定出TD50，见表2。
3.3 附子与甘草不同配伍比例含药血清对乳鼠心肌细胞的毒性影响 与血清空白组比较，附子以及附子配伍不同比例甘草不同浓度含药血清吸光度没有明显差异 ......
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