丹参转基因毛状根离体培养体系的建立及分析(1)
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[摘要] 目的：建立起丹参的转基因毛状根诱导及离体培养体系。方法：考察了不同外植体、不同农杆菌侵染时间和共培养时间诱导丹参毛状根的效率，共培养外植体用400 g·L-1 Cef水除菌5 min，接种在MS+400 g·L-1 Cef+2.5 g·L-1 Hyg的固体培养基上，完全除菌后转接入6，7V+2.5 g·L-1 Hyg液体培养基继代培养，GFP荧光检测阳性毛状根，PCR检测农杆菌特征基因rolC，并测定不同生长时期的毛状根干重和二氢丹参酮I的积累。 结果：用丹参叶片基部诱导毛状根，成功率可达到93.3%；农杆菌侵染10 min诱导效率最高为63.3%；共培养2～3 d诱导效果最好；PCR结合GFP荧光检测的方法鉴定阳性转基因材料具有较高的可信性；丹参毛状根生物量变化与次生代谢物积累之间有着紧密联系。结论：成功建立起丹参转基因毛状根离体培养体系，为进一步的基因工程应用打下基础。
[关键词] 丹参；毛状根；转基因；离体培养
[稿件编号] 20120330008
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81072990，30901965)
[通信作者] *黄璐琦，研究员，Tel： (010)640144112955，Email： huangluqi@263net 唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge是治疗心血管系统疾病的临床常用中药，主要含有2种有效成分，脂溶性的二萜醌类化合物和水溶性的酚酸类化合物，具有抗菌消炎、抗血栓形成、抗心肌缺血、保肝及抗氧化的作用[1]，有着广阔的应用前景。但由于丹参野生资源有限，有效成分在原植物根中含量低、生长周期长等原因 ......
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