长柄链格孢菌对熊果酸的生物转化工艺优化(3)
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参见附件。
3.7 底物加入量对消耗率的影响
底物加入量的单因素试验水平选择在每瓶培养基中底物加入量分别为8，13，18，23，28 mg。其他转化条件为孢子浓度4%，摇床转速为160 r·min-1，转化温度为28 ℃，在加入底物4 d后取样处理，测定消耗率，并绘制消耗率随底物加入量变线，结果见图4。
当每瓶的加药量在8～18 mg时，菌株对熊果酸的消耗率和28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率随着加药量的增加而有所增加。当加药量为18 mg时，熊果酸的消耗率和28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率达到最大；当加药量大于18 mg时，熊果酸的消耗率和28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率反而降低。表明熊果酸作为底物加入，在浓度较低的时候会被长柄链格孢菌利用，同时生成转化产物，但是随着浓度的进一步增加，一方面加入的有机溶剂量随之增大，可能会对菌体产生一定程度的危害；另一方面，底物量过饱和，超过了菌体的转化能力，因此熊果酸消耗率和28OβD吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率呈现下降趋势。所以选择加药量18 mg，质量浓度为0.3 g·L-1。
3.8 转化时间对转化率的影响
转化时间的单因素试验选择每瓶培养基的转化时间分别为0.5，1，2，3，4 d，其他条件为每瓶加入孢子4%、熊果酸18 mg、转化温度28 ℃、摇床转速160 r·min-1。培养结束后取样分析并绘制消耗率随转化时间变化的曲线，结果见图5。
图5 转化时间对底物和转化产物的影响
Fig5 Effect of transformation time on substrate and transformation products
反应时间在0 ......
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