金雀异黄酮与芹菜素的雌激素样作用体外研究(2)

http://www.100md.com 2012年8月1日 朱瑞清 葛宝丰 杨斌 陈克明 文益民 周建 韩桂秋 程国政 翟远坤

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    参见附件。

     PCR检测：按照Applied Biosystems公司7300仪器操作说明进行实验。其中PCR反应体系20 μL，包括SYBR Premix Ex TaqTMⅡ(2×)10 μL，PCR forward primer(10 μmol·L-1)0.8 μL，reverse primer(10 μmol·L-1)0.8 μL，ROX reference Dye或Dye Ⅱ(50×)0.4 μL，cDNA模板2 μL(50 mg·L-1)，补RNase free水至20 μL。PCR反应条件：两步法反应条件95 ℃预变性30 s；94 ℃变性5 s，退火31 s，40个循环；Realtime RTPCR数据分析处理采用ΔΔCt法，采用2-ΔΔCt表示数据的结果[5]。

    2.5 统计学分析 实验结果采用±s表示，运用统计软件SPSS 130软件，采用方差分析(ANOVA)进行统计处理，两组间比较采用t检验，以P<0.05 作为差异存在统计学意义，P<0.01为差异有极显著统计学意义。

    3 结果

    3.1对MCF7细胞增殖的影响 MTT法测定对MCF7细胞增殖的影响，E2 1×10-8 mol·L-1、金雀异黄酮和芹菜素1×10-7 ～1×10-10 mol·L-1处理1，2，3 d时对MCF7细胞增殖无明显影响，直到处理第4天时才能明显促进雌激素受体阳性MCF7细胞增殖。但金雀异黄酮和芹菜素的促增殖作用无明显差别(图2) ......

    http://www.100md.com/html/paper/1001-5302/2012/15/28-1.htm

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