人参皂苷Rg1诱导人白血病K562细胞株衰老的实验研究(1)
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[摘要] 目的:观察人参皂苷Rg1(Rg1)诱导人白血病K562细胞株衰老的作用及其机制。方法:MTT比色法检测Rg1对K562细胞增殖的影响,筛选最佳作用浓度及时间(20 μmol·L-1,48 h)。流式细胞术检测Rg1对细胞周期的影响;SAβGal染色检测细胞阳性染色百分率;RTPCR法检测衰老相关基因p16,p53,p21,Rb的表达;电镜观察细胞衰老超微形态学改变。结果:Rg1在体外能明显抑制K562细胞增殖,使细胞阻滞于G2/M期;SAβGal染色阳性细胞百分率显著增高(P<0.05);细胞衰老相关基因的表达上调(P<0.05);超微结构观察显示细胞增大,异染色质凝集、碎裂,线粒体体积增大,溶酶体体积增大、数目增多等衰老形态学变化。结论:Rg1能诱导K562细胞衰老,p53p21Rb,p16Rb信号转导通路在其衰老调控中起重要作用。
[关键词] 人参皂苷Rg1;白血病;K562细胞株;细胞衰老
生物学及其相关机制,旨在为天然药物有效成分促进肿瘤细胞的衰老提供实验依据,为白血病等肿瘤的治疗提供新的思路和方法。
1 材料
K562细胞株由重庆医科大学检验医学院惠赠。人参皂苷Rg1购自吉林宏久有限公司(纯度98.6%),用RPMI1640培养液配制成1 g·L-1的溶液,过滤除菌。RPMI1640培养基购自美国GIBCO公司,胎牛血清购自杭州四季青公司。MTT比色实验相关试剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。衰老相关β半乳糖苷酶(SAβGal)染色试剂盒购自美国Cell Signaling公司 ......
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