墨旱莲对香烟提取物杀伤NHBE细胞的保护作用及机制(2)
NQO1活力=(A开始-A结束)/反应时间(3 min)/蛋白浓度2.5 Western blot检测细胞中NQO1蛋白表达 细胞裂解液煮沸变性后进行SDSPAGE凝胶电泳,灌制5%浓缩胶,13%分离胶,上样量30 μL,恒压80 V 20 min,之后把电压提高到100 V,继续电泳90 min,然后恒流200 mA,120 min湿转,将蛋白从SDSPAGE凝胶转至PVDF膜上,BSA封闭后加入抗NQO1抗体(1∶200)孵育过夜,最后加入二抗孵育2 h,ECL显色。
2.6 统计学分析 数据用±s表示,采用SPSS 16.0统计软件经行方差分析,组间比较采用t检验,P<0.05为有显著性差异,P<0.01为有极显著性差异。
3 结果
3.1 墨旱莲提取物对NHBE细胞增殖的保护作用 CSE对NHBE有损伤作用,10%CSE作用24 h对细胞的抑制率为30.21%。在较低浓度下,墨旱莲可以有效降低CSE对NHBE的毒害作用,且有着量效关系,其中在125 μg·L-1下细胞的抑制率为18.39%。在较高的浓度下,墨旱莲具有一定的细胞毒作用 ......
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