川白芷花药培养技术体系的建立(1)
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[摘要] 目的：探讨川白芷花药培养中愈伤组织诱导和植株再生条件。方法：以川白芷花药为外植体，以MS为基本培养基，研究低温(4 ℃)预处理时间、光暗培养条件以及不同激素配比对川白芷花药培养愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果：不经过低温预处理的花药诱导率最高，低温预处理2 d的花药诱导率次之；暗培养为最佳培养条件；诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+20 mg·L-1 2，4D+10 mg·L-1 6BA，愈伤组织诱导率可达3889%；MS+05 mg·L-1 NAA+15 mg·L-1 KT+10 mg·L1 AgNO3适于不定芽的诱导，不定芽转入附加05 mg·L-1 IBA的1/2 MS的生根培养基上，生根后获得完整的再生植株。结论：初步建立了川白芷花药培养愈伤组织诱导及植株再生体系。
[关键词] 川白芷；花药培养；愈伤组织；再生植株
1 材料
供试材料为川白芷 A dahurica var formosana，采自四川农业大学农场试验田。
2010年5月于花期开始，每天上午8：00—10：00取健壮植株上的花蕾，用品红染色观察花粉发育时期，取花粉发育处于单核靠边期的花蕾(花蕾长度约为2 mm左右)。
2 方法
21 花蕾的消毒与花药的接种 经过4 ℃预处理(或未经4 ℃预处理)的花蕾先用70%的乙醇消毒30 s，无菌水冲洗3次，再用01%升汞消毒10 min，无菌水冲洗3～4次，置于无菌滤纸上。用消毒的镊子和解剖针剖开花蕾，取出花药，接种于不同激素配比的MS培养基上，培养基中附加30 g·L-1蔗糖和7 g·L-1琼脂，pH 58～60，每瓶接10～15个花药，每个处理10瓶，重复3次 ......
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