黄葵胶囊对阿霉素肾病肾组织炎症信号通路p38MAPK的干预作用(2)
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参见附件。
2.3 一般情况和肾脏外观特征 每天观察各组大鼠精神、饮食、饮水、皮毛色泽以及活动情况等;药物和蒸馏水干预前后,每周末称量大鼠体重;处死大鼠前观察肾脏外观特征;摘除大鼠肾脏后,称量肾脏质量(肾重)。
2.4 尿蛋白排泄量 在给药前及给药后每周末检测24 h尿蛋白排泄量(24 h urinary protein excretion,Upro)。分别将3组大鼠放入金属代谢笼,禁食,自由饮水,收集24 h尿液,并测量尿量。倍比稀释后,采用考马斯亮蓝法测定Upro(鼓楼医院检验科)。
2.5 血清生化指标 药物干预后第4周末,在氯胺酮麻醉状态下解剖大鼠胸腔,经心脏采血5 mL。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清白蛋白(albumin,Alb),血清肌酐(serum creatinine,Scr),血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)等指标(鼓楼医院检验科)。
2.6 肾小球形态特征 解剖大鼠腹腔,自肾门处摘取左侧肾脏。肾脏摘除后,分离皮、髓质,并取少量肾皮质(一般选肾脏的上极或下极)固定于10%中性甲醛内,经脱水16 h后,石蜡包埋,切片3 μm,进行过碘酸雪夫(periodic acid schiff,PAS)染色和Masson染色;借助光学显微镜(光镜),观察肾小球内系膜细胞(mesangial cell,MC)数量、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)及其胶原成分沉积程度;每张切片随机选取30个肾小球,采用病理图像分析系统imagepro plus(IPP)计算肾小球内MC数量、ECM和胶原相对面积(ECM或胶原面积/肾小球面积)。再取少量肾皮质,用3.75%戊二醛和1%锇酸固定 ......
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