1对人神经干细胞功能表达的膜片钳研究> 人参皂苷Rg1对人神经干细胞功能表达的膜片钳研究(2)
1.6 全细胞膜片钳记录 全细胞电流:在无钙细胞外液中,采用上述方法,使神经细胞形成全细胞记录模式,然后将细胞膜电位钳制在-80 mV,并给予-80~+60 mV的方波刺激,步幅为10 mV,同时记录全细胞电流和Na+,K+电流。Na+电流:在无钙细胞外液中加入TEA 10 mmol·L-1(TEA为延迟整流钾电流IDR 的特异性阻断剂)和4-AP 1 mmol·L-1(4-AP是瞬时外向钾电流[IA]的特异性阻断剂) 以阻断钾通道,CsCl作电极内液,细胞膜电位钳制在-60 mV,给予-60~+60 mV的方波刺激,步幅为10 mV,记录Na+电流。
K+电流:在无钙细胞外液中加入钠通道特异性阻断剂TTX 1 μmol·L-1 , 钳制电压在-70 mV,给予-70~+60 mV的方波刺激,步幅为10 mV,记录电压门控钾通道(Kv)。再在细胞外液中加入TEA 10 mmol·L-1或者4-AP 1 mmol·L-1,以分析K+电流成分 ......
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