三七总皂苷对大鼠肝组织内药物代谢酶CYP3A的抑制作用及其动力学分析(2)
1.9 对底物氨基比林，CYP3A的Km，Vmax的测定[7] 在测定管中加入甘油缓冲溶液、氨基比林、三七总皂苷、微粒体蛋白溶液，放入37 ℃恒温水浴5 min，而后加入辅助因子溶液启动反应(反应终浓度：氨基比林浓度分别为0，0.07，0.14，0.28，0.57，1.14，2.27，4.55，9.09，18.18 mmol·L-1，蛋白为0.36 mg·L-1)15 min后加入0.35 mL ZnSO4，混匀，放冰上5 min，加饱和Ba(OH)2 0.35 mL，混匀，放置5 min，2 500 r·min-1离心5 min，取上清液，加入Nash试剂2 mL，60 ℃水浴10 min，冷水冷却。420 nm测定其吸光度，以底物浓度为0 mmol·L-1管作对照 ......
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