鼓泡式生物反应器培养人参不定根的研究(2)
2.5 人参皂苷含量测定精密称取0.2 g干燥粉碎的人参不定根培养物粉末,置于100 mL具塞三角瓶中,加入20 mL甲醇,60 ℃水浴1 h,真空抽滤,收集滤液。滤渣连同滤纸再加入等量的甲醇重复水浴提取、抽滤1次,合并滤液。滤液蒸发干燥后溶于20 mL水饱和正丁醇,用分液漏斗萃取4次,合并萃取的正丁醇溶液,浓缩至干,残渣溶解在甲醇中,定容到1 mL,振荡,用0.22 μm微孔滤膜过滤,得供试品溶液。色谱条件:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。流动相A-乙腈,B-水。梯度洗脱:0~9 min,26% A,0.5 mL·min-1;9~10 min, 26%~18% A,0.5 mL·min-1;10~15 min,18% A,0.5 mL·min-1;15~16 min,18%~35% A,0.5~1.0 mL·min-1;16~30 min,35%~40% A ......
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