基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法研究(1)
[摘要] 目的:筛选获得金银花真伪鉴别SNP位点并建立双向位点特异性PCR方法,用于鉴别金银花和其常见伪品以及两者的混杂品。方法: 通过对GenBank收录的忍冬属植物叶绿体trnL-trnF序列进行对比分析,获得金银花真伪鉴别SNP位点;并依据该SNP位点设计特异性引物,对84份金银花基原植物及其市售饮片、伪品进行双向位点特异性PCR扩增,并根据真伪品的特异性条带进行金银花药材鉴别。结果:退火温度为61 ℃时,正品均出现468 bp的条带,红腺忍冬、华南忍冬、灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬、水忍冬、金银忍冬、郁香忍冬、新疆忍冬、繁果忍冬等9个伪品均出现324 bp的条带,在正品DNA中掺入5%以上伪品时同时出现正品和伪品条带。结论: 双向位点特异性PCR可以鉴别金银花真伪品及两者的混杂样品。[关键词] 双向位点特异性PCR;金银花;分子鉴定
[稿件编号] 20120606006
[基金项目] 国家自然科学基金项目(81001605);中药制药过程新技术国家重点实验室开放基金项目(SKL2010M0101)
[通信作者] *袁媛 ......
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