2.5 预培养时间与共培养时间 先将叶柄置于分化培养基上预培养一段时间，再用农杆菌侵染。预培养时间为0，2，4，6 d；共培养时间设为1，2，3，4，5 d。共培养后进行选择培养。

    2.6 抗性植株的获得 将选择培养基上叶柄两端形成的抗性小块茎，转接在含有100 mg·L^-1 Kan和350 mg·L^-1 Carb的分化培养基上进行继代培养，15 d左右即可生长成小植株。

    2.7 转基因植株的鉴定 从抗性半夏植株上剪取幼嫩组织提取基因组DNA。以sHSP基因的序列设计特异性引物，正向引物5′-GGATCCATGGACGTCAGGATGTTGGGA-3，反向引物5-GGATC-CAAAAAGACCATTAGACGACC-3。以未转化植株DNA为阴性对照，以质粒DNA为阳性对照同时进行PCR扩增。PCR反应体系为25 μL： ddH2O 14 mL，10×PCR buffer 2.0 μL，25 mmol·L^-1 MgCl2 2.0 μL ......