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编号:13174657
利用气升式生物反应器培养铁皮石斛原球茎(2)
http://www.100md.com 2012年12月15日 《中国中药杂志》 2012年第24期
     2.2 多糖和石斛碱含量的测定

    2.2.1 多糖含量的测定 参照李满飞等[3]的方法提取多糖并测定含量。精密称取干燥的葡萄糖100 mg置于100 mL量瓶中,加蒸馏水适量溶解、定容。精密量取10 mL溶液置100 mL量瓶中,用蒸馏水定容,为对照品溶液。精密量取对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8 mL,分别置试管中,各加蒸馏水至2.0 mL,再加苯酚试液1.0 mL,摇匀, 迅速滴加浓硫酸5.0 mL,迅速摇匀,放置5 min,置沸水浴中加热15 min,取出,冷水迅速冷却至室温,以蒸馏水作为空白对照。用分光光度计于490 nm处测定吸光度,然后绘制标准曲线,求得回归方程。

    将在3 L反应器中培养(接种密度10 g·L-1,通气量0.2,光照强度1 600 lx)30 d的铁皮石斛原球茎磨碎,取10 g粉末,加8倍体积蒸馏水,68 °C下浸3 h,过滤得提取液。提取液在4 °C冷却20 min,加2倍体积95 %的乙醇,多糖沉淀后,用离心机离心(4 000 r·min-1)5 min ......
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