2.4 测序 经过PCR扩增后，PCR原产物由北京擎科新业生物技术有限公司测序部测序，各样品均采用正向测序。

    2.5 序列分析 将7种药材的24个个体进行序列的比对分析，所得DNA序列用CONTIG软件同源对齐，并辅以人工校对。以尽量减少排列所缺失的数目； 排序后的序列使用BioEdit分析软件进行分析处理。用MEGA 4分别计算各样品ITS序列的差异性(Kimura 2-parameter )， 并采用邻接法(NJ法) 和非加权平均法(UPGMA法)分别构建了系统发育树。构建系统发育树，并以Bootstrap作1 000次可信度分析。

    3 结果与讨论

    3.1 黄芪与其混伪品的ITS序列特征 本实验测得了黄芪与其混伪品的19份样品ITS序列，ITS全序列长度为646～728 bp，分别为蒙古黄芪646～650 bp，其中(G+C)%为53.08%～53.10%； 膜荚黄芪为646～650 bp，其中(G+C)%为53.08%～53.10%；红芪为664 bp，其中(G+C)%为53.77%；紫花苜蓿为659 bp，其中(G+C)%为48.26%；蜀葵为728 bp ......