甘草鲨烯合酶基因多态性对其编码酶催化效率影响的研究(2)
2.2 PCR扩增根据NCBI核酸数据库中甘草SQS基因的2个拷贝SQS1(AM182329)、SQS2(AM182329)及光果甘草的SQS1(D86409)序列,设计PCR引物,SQS 1上游引物CoF1:5-ATGGGGAGTTTGGGAGCGAT-3′;下游引物CoR4:5′-CGTGTTTGACCATTCGTTTC-3′;SQS2上游引物CoF2:5-ATGGGGAGTTTGGGAGCGAT-3;下游引物CoR2:5-CTAGTTATTTTGGCGGTTGGCAG-3。PCR反应体系:50.0 μL的反应体系中,包含cDNA 2.5 μL;10×PCR buffer (Mg2+Plus)5.0 μL;dNTP(2.5 mmol·L-1 each) 8.0 μL;上游引物(5 μmol·L-1)4.0 μL;下游引物(5 μmol·L-1)4.0 μL;LA Taq(5 U·μmol·L-1)0.5 μL;ddH2O 26 μL ......
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