1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，用胶回收试剂盒回收目的条带，然后连入pM-HSL9-T载体中进行TA克隆，获得重组质粒，转化E.coli DH5α感受态细胞，在含有氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性克隆。PCR检测为阳性的菌液取至少3个直接送样，测序由上海生工生物工程有限公司完成，同时留500 μL菌液加等体积30%的甘油，-80 ℃长期保存。

    2.1.3 HMGR基因表达载体的构建 将测序正确的HMGR-T重组质粒扩大培养，按照博迈德小型质粒提取试剂盒的操作步骤进行质粒提取。对质粒进行双酶切，双酶切体系为：50.0 μL的体系中，包含质粒30 μL；1×M Buffer 5.0 μL；HindⅢ 2.0 μL；KpnⅠ2.0 μL；ddH₂O11.0 μL。37 ℃金属浴3 h，1%琼脂糖凝胶电泳检测，用胶回收试剂盒回收目的条带。将目的片段与表达载体相连接，连接体系为：10.0 μL的体系中包含10×T4 Buffer 1.0 μL；T4 DNA Ligase 1.0 μL；pET-32a 1.5 μL；HMGR 6.0 μL；ddH₂O0.5 μL ......