宿半夏SRAP PCR反应体系优化的研究(1)
宿半夏SRAP PCR反应体系优化的研究,SRAP-PCR,正交设计
[摘要] 目的: 研究宿半夏SRAP-PCR分子标记技术的优化体系。方法:采用L16(54)正交设计对宿半夏SRAP-PCR反应体系进行了5因素(dNTPs,Mg2+,模板DNA,引物,Taq酶)4水平优化筛选。结果:半夏SRAP最适合的正向引物是5-TGAGTCCAAACCGGAAG-3,反向引物为5-GACTGCGTACGAATTACG -3。优化的反应体系为25 μL反应体系中含有70 ng DNA模板,0.9 μmol·L-1引物,0.2 mmoL·L-1 dNTPs,1.5~2.0 mmol·L-1 Mg2+,2.0 U Taq酶。结论: 宿半夏SRAP-PCR体系的建立为今后构建半夏SRAP遗传图谱奠定了基础。[关键词] 半夏;SRAP-PCR;反应体系优化;正交设计
[稿件编号] 20121106013
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30973963);安徽省自然科学基金项目(090413252);安徽高校省级自然科学研究重点项目(KJ2009A160);宿州学院特色种植业苗种生产工程技术研究中心项目(2011YKF18)
[通信作者] *薛建平 ......
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