2.2成骨细胞增殖分析原代细胞长满80%皿底后传代，以2×10³ 个/孔接种于96孔板中。24 h后加入不同浓度的柚皮苷，终浓度分别为1×10^-4，1×10^-5，1×10^-6，1×10^-7 mol·L^-1，对照组加入不含柚皮苷的溶剂DMSO(每1 mL培养液1 μL)，每组平行做6孔。48 h后弃培养液，PBS洗2次；换含0.5% MTT的无血清α-MEM培养液，继续培养4 h。弃培养液，每孔加入100 μL DMSO，振荡10 min，酶标仪上测定570 nm处的吸光度A。

    2.3 ALP活性检测及最佳药物浓度的确定P₁代细胞以2×103 个/孔接种于96孔板，待其铺满孔底后更换为成骨诱导性培养基，实验组分别加入终浓度为1×10^-4，1×10^-5，1×10^-6 ......