延胡索甲素和乙素的人源肠内菌丛生物转化及在人源Caco—2细胞单层模型的吸收转运(2)
2方法2.1普通厌氧培养基(general anaerobic medium,GAM)的配制
详见文献[13]。
2.2人肠内菌丛培养及其CDL,THP的转化
取10号自封袋,充满N2,然后挤压出全部气体,再通入N2。如此重复2次,再次充满N2,将志愿者一次排便的所有粪便装入,封口。用手挤压自封袋,使粪便均质化;在厌氧无菌操作条件下,取3~5 g粪便放入到盛有200 mL刚刚加热沸腾并立即冷却的GAM培养基的250 mL具塞三角瓶中,通入N2驱除空气,加塞、封口,置厌氧培养箱中,在37 ℃下培养24 h;然后取出菌液约1 mL,加至已装有灭菌GAM的新试管中;封口膜密封,标记,在37 ℃下活化培养24 h。取此菌液5 mL,植入装有180 mL培养基的250 mL三角瓶中,在厌氧培养箱中培养24 h后加入2.43 mg CDL的二甲基亚砜(DMSO)溶液,在100 r·min-1 ......
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