中药材DNA条形码分子鉴定指导原则(2)
1.2.3 PCR扩增 植物类中药材及其基原物种扩增ITS2或psbA-trnH序列,动物类中药材及其基原物种扩增COI序列,通用引物及扩增条件如下,具体如有改变见各药材项下。ITS2序列扩增正向引物ITS2F:5′-ATGCGATACTTGGTGTGAAT-3′;反向引物ITS3R:5′-GACGCTTCTCCAGACTACAAT-3′。psbA-trnH序列扩增正向引物psbAF:5′-GTTATGCATGAACGTAATGCTC-3′;反向引物trnHR:5′-CGCGCATGGTGGATTCACAATCC-3′。COI序列扩增正向引物HCO2198:5′-TAAACTTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′;反向引物LCO1490:5′-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3′。
PCR反应体系以25 μL为参照,包括 1× PCR缓冲液(不含Mg2+Cl2) ......
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