小檗碱、莲心碱和甲基莲心碱对HERG通道表达的影响(2)
2.4 Western blot检测小檗碱对大鼠心肌组织IKr通道蛋白表达的影响 将大鼠分为空白对照组，5，10，20 mg·L-1加药组，分别尾静脉注射生理盐水和相应浓度的小檗碱溶液，24 h后，取心肌组织并提取组织膜蛋白，测定膜蛋白浓度，放置于-80 ℃超低温冰箱中待用。取等量样品，加入等体积的5×上样缓冲液后，煮样、电泳、转膜、封闭[4]，加入一抗(多克隆羊抗体1∶200)，室温孵育1.5 h，用PBS-T缓冲液洗膜3次，每次15 min，然后用红外荧光标记的二抗(驴抗山羊IgG Alexa Fluor 680，1∶4 000)，避光孵育1 h，用PBS-T缓冲液洗膜3次，每次15 min，再用PBS洗膜15 min，洗去Tween-20以降低背景，以上过程均需避光。Odyssey红外荧光扫描成像系统对膜上蛋白质进行检测，用图像分析软件Scion Image进行吸光度积分值分析。2.5 统计学处理 实验数据以 ±s表示 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4024 字符。