芦丁完全抗原的合成鉴定及免疫原性分析(3)
以质量浓度为横坐标,不同质量浓度(56,28,14,7,3.5 mg·L-1)的芦丁对照品溶液在364 nm处的紫外吸光度为纵坐标,计算回归方程。结果表明芦丁在3.5~58 mg·L-1的紫外吸光度与浓度有很好的线性关系,回归方程为Y=0.026X-0.012 6,R2=0.993 5。根据回归方程及相同质量浓度的偶联物和BSA或OVA的吸光度即可计算出芦丁抗原的偶联度为11.27∶1与13.99∶1,处于半抗原与载体的偶联比的最佳范围(5∶1~20∶1)[7]内,偶联度较好。3.2 SDS-PAGE凝胶电泳结果
由芦丁的SDS-PAGE凝胶电泳图谱(图1)可以看出,牛血清蛋白和卵清蛋白的电泳速度大于芦丁蛋白偶联物,说明偶联物的相对分子质量比牛血清蛋白和卵清蛋白的相对分子质量大,证明芦丁与牛血清蛋白或卵清蛋白偶联成功。
3.3 抗血清的效价分析
用ELISA 法测定家兔的抗体效价 ......
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