超滤法测定牛蒡苷及牛蒡苷元的血浆蛋白结合率(2)
实验结果表明,牛蒡苷与大鼠血浆蛋白有中等强度[3]的结合,与人血浆蛋白结合率略低于与大鼠血浆蛋白结合率,牛蒡苷与血浆蛋白的结合不受浓度的影响,无浓度依赖性。牛蒡苷元与大鼠血浆和人血浆均有很强的结合,结合率均在90%以上,此结合情况亦无浓度依赖性。3 讨论
研究药物血浆蛋白结合率的方法较常用的是平衡透析法和超滤法。平衡透析法平衡时间较长,测定结果受稀释作用、Gibbs-Donnan效应以及体积迁移效应的影响。超滤法利用半透膜原理,设备简单、操作方便、不受稀释效应和体积迁移的影响,可实现血浆中游离药物的快速分离,加之可与高灵敏的检测技术相结合,超滤法已广泛应用于大规模生物样品的游离药物浓度测定[8-9]。实验中对牛蒡苷和牛蒡苷元与血浆蛋白结合时间进行了考察,测定在37 ℃下,温孵10,20,40,60,90,120 min时血浆蛋白结合率情况,结果表明温孵40 min,结合基本稳定,温孵时间延长,两者的血浆蛋白结合率均无明显变化;将超滤液以10%高氯酸溶液检查是否有蛋白漏出 ......
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