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编号:13171504
华佗再造浸膏对大鼠局灶性脑缺血/再灌注血脑屏障损伤的保护作用及机制研究(2)
http://www.100md.com 2013年2月15日 《中国中药杂志》 2013年第4期
     2.3神经功能缺陷评分分别采用不同的试验人员按照随机盲法原则对实验大鼠进行2次评分,大鼠脑缺血后从术中清醒后2 h,进行第1次评分;再灌注24 h后进行第2次评分。参照Longa等5分制评分标准:0分,正常,无神经学征象;1分,动物不能完全伸展左前肢;2分,动物左侧肢体瘫痪,行走时向左侧转圈,出现追尾现象;3分,动物行走向左侧跌倒,或动物不能站立或打滚;4分,无自发活动,有意识障碍。神经功能缺陷评分在1~3分为造模成功。除假手术组外,各组0分(模型不成功)和4分(损伤过于严重,24 h内死亡)予以剔除,在后续试验中补充剔除组的动物,以保证每组的动物数[6-7]。表1 为各组剔除和补充动物评分状况,可见剔除动物于各组间分布呈不规律。

    2.4Western blot法测定MMP-2,MMP-9,GRK2表达再灌24 h后动物进行第2次神经行为评分后,称体重,以4%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血5 mL,最后迅速断头取脑,去除嗅球及小脑部分,置于冰浴台上,脑向后冠状切成约3 mm厚脑片,于皮层距缺血中心外侧缘1 mm处取材,提取的脑组织于4 ℃, 3 000×g离心4 min,收集上清再于4 ℃ ......
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