HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的方法学探讨(3)
前期研究表明钩藤药材溶液中生物碱在60~80 ℃ 长时间加热(8 h以上)条件下稳定性较差,但考察不同提取时间(30,60,90 min)对钩藤中钩藤碱与异钩藤碱含量的影响,结果并无显著性差异,同时钩藤供试品溶液与对照品溶液室温放置24 h均稳定,且超声加样回收率合格。因此可推测钩藤碱与异钩藤碱在钩藤药材中是相对稳定的,其回流提取时加样回收率及对照品提取回收率不合格可能是加热操作造成的,而对照品溶液在超声提取时成分转化的原因有待进一步的研究。在色谱条件的考察过程中,对检测波长、流动相组成、样品提取方式、提取溶剂及提取时间均做了考察,经HPLC-DAD检测器全波长扫描,钩藤碱和异钩藤碱在波长245 nm处有最大吸收,与文献报道基本一致[8-11];分别考察甲醇、60%甲醇及水3个溶媒及不同提取时间对钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量的影响,结果确定提取条件为钩藤用60%甲醇超声提取30 min。
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