紫金牛三萜皂苷TSP02抑制人肝癌细胞增殖和侵袭作用机制研究(2)
1.6细胞划痕实验 在6孔板的每孔内加入5×105个细胞,用枪头比着直尺在细胞表面划一条直线,用PBS洗3次。分别设立对照组,给药组(0.625,1.25 μmol·L-1)。培养0,24,48 h后倒置显微镜下(×200)拍照并测量划痕距离。1.7Transwell小室体外侵袭实验 用预冷的无血清RPMI 1640培养基以1∶10稀释Matrigel,吸取Matrigel前应注意充分混匀,每上室加入稀释后的Matrigel约100 μL,室温放置2 h;使用前加入200 μL无血清RPMI 1640培养基冲洗以重新水化并吸收;将细胞消化用无血清RPMI 1640培养基重悬,计数并稀释至2.5×105个/mL,取100 μL加入Transwell上室中,下室加入600 μL 10%血清的RPMI 1640培养基(血清作为趋化因子),分别设对照组,给药组0.625,1.25 μmol·L-1;按照Transwell小室说明书操作。
1.8统计学分析 采用SPSS 19.0进行统计学分析 ......
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