2.2.2 半定量表达分析 RT，PCR反应体系：RNA 1 μg，Oligod(T)18 1 μL，RiboLock RNase Inhibitor 0.5 μL，10 mmol·L^-1 dNTP 1 μL，RiboLock RNase Inhibitor 1 μL，5×Reaction buffer 5 μL。逆转录条件：42 ℃ 60 min；65 ℃ 15 min。将合成双链cDNA放于-20 ℃保存，备用。PCR 扩增条件为：95 ℃ 5 min；95 ℃ 30 s，50 ℃ 30 s，72 ℃ 1 min，共40个循环；72 ℃ 10 min。

    2.3 亚细胞定位

    2.3.1 载体构建 根据SmERF1基因和载体pE3025的酶切位点分析，选择Kpn Ⅰ和EcoR Ⅰ2个限制性内切酶构建融合表达载体，设计引物为：SmERF1，S，L： CGgaattcATGTGTGGTGGTTCAAtAATT TC，SmERF1，S ......