清开灵注射液中14种胆汁酸的HPLC,ESI,MS/MS快速鉴定(2)
尽管ELSD是一种通用型检测器,几乎对所有非挥发性成分都会有响应,并消除了杂质和流动相的紫外吸收干扰,但是基线噪音偏大、灵敏度偏低是其难以克服的缺陷,限制了其在微量成分定性定量研究中的应用。LC,MS是当前已经发展成熟的在线分析技术,其将高效液相色谱优秀的分离能力与质谱的高灵敏度、高专属性有机地结合在一起,是分析复杂物质体系最有效的检测工具。试验结果表明,LC,MS对于胆汁酸类成分的响应非常灵敏,无论是正离子模式还是负离子模式,检测到的胆汁酸类成分的数量都比ELSD多,对于阐明注射液中胆汁酸类成分的组成非常有利。由于大量同分异构体的存在,前期的色谱分离对于LC,MS区分该类成分尤为重要。试验结果表明,不同的流动相系统对色谱图整体面貌有较大的影响。采用乙腈,水系统时,部分含量偏低的色谱峰易被掩盖于含量高的色谱峰中,导致检出的成分偏少。因此,通过优选确定以乙腈,甲醇(3:1)混合溶液作为有机相,以0.2%乙酸溶液作为水相,可以更好地实现胆汁酸类成分同分异构体的有效分离 ......
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